(Com a proveïdor de confiança, HANGZHOU JECI BIOCHEM ofereix NAD (nicotinamida adenina dinucleòtid, CAS 53-84-9) de -producció estable i d'alta{1}} qualitat, que ofereix suport de matèries primeres fiable per a aplicacions d'IVD i d'assaig metabòlic. La nostra producció constant i el control de qualitat estricte ens converteixen en un soci preferit per al subministrament de NAD de diagnòstic-.)
El NAD (nicotinamida adenina dinucleòtid) és un important coenzim present naturalment a les cèl·lules, existent en dues formes: forma oxidada (NAD⁺) i forma reduïda (NADH). Es pot interconvertir mitjançant reaccions redox, regulant diversos processos biològics com el metabolisme energètic cel·lular i la transducció de senyals. El NAD participa en reaccions enzimàtiques clau per capturar els canvis dels metabòlits, i les anomalies en els nivells de NAD i NADH i les seves proporcions estan estretament relacionades amb l'aparició i desenvolupament de moltes malalties. Per tant, s'ha convertit en un marcador important per a les proves bioquímiques clíniques i el cribratge precoç de la malaltia. Els productes NAD d'alta -puresa i alta-estabilitat-de diagnòstic-, com a matèries primeres bàsiques per als reactius de diagnòstic in vitro (IVD) i els kits de proves metabòliques, tenen un paper clau en la millora de la sensibilitat de la detecció i la fiabilitat dels resultats.
Historial de desenvolupament del grau diagnòstic-NAD
El 1906, Arthur Harden va descobrir un "misteriós factor coenzim" que promou el metabolisme durant el seu estudi de la fermentació de l'alcohol de llevat (més tard es va demostrar que era NAD).
El 1929, Hans von Euler-Chelpin va identificar l'estructura dinucleòtid del NAD.
El 1930, Otto Warburg va dilucidar el mecanisme redox entre el NAD i el NADH, aclarint que el NADH presenta una absorció ultraviolada característica a 340 nm mentre que el NAD no té absorció a aquesta longitud d'ona, establint les bases teòriques per als assajos enzimàtics.
El 1948, Horecker et al. va confirmar el coeficient d'extinció molar de NADH a 340 nm, permetent la quantificació directa de les velocitats de reacció enzimàtica mitjançant canvis d'absorbància [1].
El 1961, Oliver H. Lowry va establir el mètode de ciclisme NAD(P)/H, pioner en l'anàlisi quantitativa de NAD(P)/H teixit/cel·lular.
De 1962 a 1963, Boehringer Mannheim (posteriorment adquirit per Roche) va llançar un kit de reactius basat en la detecció d'absorbància de NADH a 340 nm per a la lactat deshidrogenasa (LDH), aconseguint la primera aplicació comercial de NAD de grau diagnòstic com a matèria primera de coenzim.
El 1973, Bernofsky et al. va establir el principi del sistema d'amplificació ADH-PES-MTT (sistema colorimètric ADH{-PES{-MTT) [2];同年, Kato et al. (Lowry Laboratory) va desenvolupar el mètode de cicle enzimàtic dual ADH-MDH-, que permet la detecció altament sensible de NAD/NADH [3].
Des d'aleshores, el NAD de diagnòstic-s'ha convertit en una matèria primera bàsica per a les proves bioquímiques rutinàries i s'ha expandit contínuament a camps-avantguardistes com ara la investigació de biomarcadors de malalties neurodegeneratives, el seguiment del metabolisme del tumor i l'avaluació de l'envelliment.
Escenaris d'aplicació NAD de grau - de diagnòstic
Matèries primeres bàsiques per al diagnòstic bioquímic clínic
① Detecció de lactat deshidrogenasa (LDH).
Principi de detecció:
Lactat+NAD+⟶LDHPiruvat+NADH+H+
Escenaris d'aplicació: Departament de Cardiologia (diagnòstic d'infart agut de miocardi), Laboratori Clínic (diagnòstic d'anèmia hemolítica), Hepatologia (valoració de lesions de cèl·lules hepàtiques), etc.
Interval normal de LDH: 140 - 280 U/L (adults, hi ha diferències entre els mètodes)
Importància clínica: > 280 U/L (indica danys als teixits (fetge, cor, ronyó, músculs, pulmó, etc.)), > 500 U/L (observat habitualment en infart de miocardi, anèmia hemolítica, tumors malignes, infeccions greus).
② Detecció de malat deshidrogenasa (MDH).
Principi de detecció:
Àcid Màlic+NAD+⟶MDHÀcid oxaloacètic+NADH+H+
Escenaris d'aplicació: Reactius clínics (diagnòstic de malalties mitocondrials), Àmbit de recerca científica (investigació de la funció mitocondrial), etc.
Interval normal de MDH: 12.5 - 50 U/L (els diferents laboratoris tenen lleugeres diferències a causa dels mètodes de detecció i reactius)
Importància clínica: L'elevació indica lesió mitocondrial, necrosi tissular, etc.
③ Detecció d'isocitrat deshidrogenasa (ICDH).
Principi de detecció:
Àcid isocítric+NAD+⟶ICDH -Àcid cetoglutàric+NADH+H+
Escenaris d'aplicació: Diagnòstic clínic de malalties mitocondrials, camp d'investigació científica (avaluació de lesions hepàtiques, investigació del metabolisme energètic), etc.
Interval normal de ICDH: 1 - 5 U/L (sèrum)
Importància clínica: L'elevació indica lesió mitocondrial, lesió hepatòcit, necrosi tissular, etc.
④Detecció de creatina quinasa (CK).
Principi de detecció:
Fosfocreatina+ADPGlucosa+ATPG-6-P+NAD+⟶CKCreatina+ATP⟶HKG-6-P+ADP⟶G6PDH6PG+NADH
Escenaris d'aplicació: Departament de Cardiologia (infart agut de miocardi, miocarditis), Ortopèdia/Urgències (lesió muscular, rabdomiòlisi), Neurologia (miopatia), etc.
Interval normal de CK: Mascles 38 - 174 U/L; Dones 26 - 140 U/L (diferències entre mètodes)
Importància clínica: els nivells elevats indiquen lesió del miocardi o del múscul esquelètic, que s'observa habitualment en l'infart de miocardi, la miocarditis, la rabdomiòlisi, l'exercici intens, etc.
⑤Detecció de glucosa
Principi de detecció:
Glucosa+ATPG-6-P+NAD+⟶HKG-6-P+ADP⟶G6PDH6PG+NADH
Escenaris d'aplicació: Endocrinologia (diagnòstic de diabetis i control de glucosa en sang), Servei d'Urgències (coma hipoglucèmic, diagnòstic d'emergència hiperglucèmic), Medicina Crítica (monitoratge de glucosa en sang del pacient UCI), etc.
Interval normal de glucosa: 3.9 - 6.1 mmol/L en dejuni; 2 hores després dels àpats < 7,8 mmol/L
Importància clínica: s'observen nivells elevats en diabetis, hiperglucèmia d'estrès; S'observen nivells reduïts en hipoglucèmia, insulinoma, malaltia hepàtica greu, etc.
⑥Detecció de lactat
Principi de detecció:
Lactat+NAD+⟶LDHPiruvat+NADH+H+
Escenaris d'aplicació: Servei d'Urgències (avaluació de xoc/hipòxia tissular), UCI (judici de rescat posterior a - pacients crítics), Departament de Cardiologia (insuficiència cardíaca), Malalties infeccioses (sèpsia), Medicina de l'Esport (avaluació de la capacitat física dels esportistes), etc.
Interval normal de lactat: 0.5 - 2.2 mmol/L (sang venosa)
以下是图片内容的英文翻译,严格保持原格式:
⑦ Detecció de galactosa
Principi de detecció:
-D-Galactosa+NAD+⟶GalDHÀcid galactònic+NADH+H+
Escenaris d'aplicació: Cribratge neonatal (Diagnòstic de galactosèmia), Pediatria (Errors innats del metabolisme), Gastroenterologia (Identificació d'intolerància a la lactosa), Hepatologia (Avaluació de la funció hepàtica), etc.
Interval normal de galactosa: Sèrum de dejuni: < 0,28 mmol/L; Nounats: < 1,11 mmol/L
Importància clínica: S'observen nivells elevats en galactosèmia, insuficiència hepàtica, deficiència congènita d'enzims metabòlics de galactosa, etc.
⑧ Detecció d'etanol
Principi de detecció:
Etanol+NAD+⟶ADHAcetaldehid+NADH+H+
Escenaris d'aplicació: Servei d'Urgències (Diagnòstic d'Intoxicació Alcohòlica Aguda), Centre d'Examen Físic (Prova d'alcoholèmia del conductor), Identificació forense (Mesuració de la concentració d'alcohol en sang), etc.
Interval normal d'etanol: 0 mmol/L (no-bevedors)
Importància clínica: Els nivells elevats indiquen consum d'alcohol o intoxicació per alcohol; concentracions excessivament altes poden provocar depressió del sistema nerviós central, inhibició respiratòria i circulatòria.
⑨ -Detecció d'hidroxibutirat
Principi de detecció:
-Àcid hidroxibutíric+NAD+⟶ -HBDHÀcid acetoacètic+NADH+H+
Escenaris d'aplicació: Endocrinologia (Diagnòstic de cetoacidosi diabètica), Nutrició (Control de la ingesta dietètica), etc.
Interval normal de -hidroxibutirat: Sang en dejuni: < 0,27 mmol/L (Diferències entre mètodes)
Importància clínica: nivells elevats indiquen cetoacidosi diabètica, inanició, dejuni-a llarg termini, cetoacidosi alcohòlica, etc.
以下是图片内容的英文翻译,严格保持原格式:
⑨ -Detecció d'àcid hidroxibutíric
Principi de detecció:
-Àcid hidroxibutíric+NAD+⟶ -HBDHÀcid acetoacètic+NADH+H+
Escenaris d'aplicació: Endocrinologia (Diagnòstic de cetoacidosi diabètica), Nutrició (seguiment de la dieta), etc.
Interval normal d'àcid -hidroxibutíric: Sang en dejuni: < 0,27 mmol/L (Diferències entre mètodes)
Importància clínica: nivells elevats indiquen cetoacidosi diabètica, inanició,-dejuni a llarg termini, cetosi alcohòlica, etc.
Biomarcadors per a l'avaluació de la malaltia
El NAD, com a biomarcador per a l'avaluació de la malaltia, es troba actualment en fase de traducció clínica. El 2022, el Q-NADMED Blood NAD⁺/NADH Detection Kit de NADMED es va convertir en el primer producte de detecció de NAD del món que va obtenir la certificació CE-IVD (Directiva de dispositius mèdics de diagnòstic in vitro). Detecta les concentracions de NAD⁺ i NADH en sang sencera humana, amb límits de detecció de NAD⁺: 330 nM; NADH: 119 nM. La concentració de NAD⁺ a la sang sencera d'adults sans és d'aproximadament 18 μM (rang: 15-23 μM) [4], utilitzada per a la detecció quantitativa de sang sencera i el seguiment dels efectes terapèutics del precursor de NAD. Tanmateix, encara no s'ha aprovat com a criteri de diagnòstic independent de la malaltia.
En l'àmbit de la investigació científica, el valor potencial de la relació NAD/NADH en líquid cefaloraquidi o sang en malalties neurodegeneratives (per exemple, malaltia d'Alzheimer, malaltia de Parkinson), metabolisme tumoral i avaluació de l'envelliment s'està estudiant profundament [5-8], però actualment s'aplica principalment en assaigs clínics i exploració de recerca científica, més que en el diagnòstic clínic rutinari.
>Panorama del mercat de NAD de grau-diagnòstic<
Actualment, el mercat global de NAD de diagnòstic-es troba en una etapa de ràpid desenvolupament impulsat per la tecnologia i el creixement de la demanda. La indústria està passant ràpidament de la importació-dominada a la substitució nacional. El camp del diagnòstic in vitro mostra una diferenciació estructural: tot i que el nombre total de kits de reactius ha disminuït, les empreses líders (per exemple, Roche Diagnostics, Mindray Medical) es mantenen estables i s'expandeixen a nous projectes com ara proves metabòliques i avaluació d'envelliment, mentre que les petites i mitjanes empreses -redueixen les línies de producció a causa de la pressió dels beneficis.
Els principals proveïdors de NAD de diagnòstic-inclouen: Roche, Oriental Yeast, SunClone Bio, Shenzhen Bangtai, etc.
Referències
[1] HORECKER BL, KORNBERG A. Els coeficients d'extinció de la banda reduïda de nucleòtids de piridina[J]. J Biol Chem, 1948, 175(1): 385 - 90.
[2] BENFORSKY C, SWAN M. Un assaig de ciclisme millorat per al dinucleòtid de nicotinamida adenina [J]. Anal Biochem, 1973, 53(2): 452 - 8.
[3] KATO T, BERNTSEN O, CARTER S, et al. Un mètode de cicle enzimàtic per a la nicotinamida - adenina dinucleòtid amb màlic i alcohol deshidrogenases [J]. Anal Biochem, 1973, 56(2): 392 - 8.
[4] NATALIA V Balshova, Lev G Zavileysky, Artem V Artukhov, et al. Assaig eficient i significat del marcador de NAD⁺ a la sang humana [J]. Front Med, 2022, 9, 886645.
[5] LAN Z P. Un nou sistema de detecció de biomarcadors i la seva aplicació a la Xina [Patent]. Xina, 119560018A[P]. 2024 - 11 - 12.
[6] YAN L, SUN MR, WU J, et al. Un tipus de sonda fluorescent per detectar nucleòsids de pirimidina i el seu mètode de preparació i aplicació: Xina, 117887460A[P]. 2025 - 09 - 02.
[7] JIN LP, ZHAO X, LU Y, et al. Determinació cromogènica del dinucleòtid de nicotinamida adenina i els seus metabòlits utilitzant nucleòsids de piridina com a cofactors i la seva aplicació en el diagnòstic o tractament de líquids fermentatius[J]. Xina, 112694070A[P]. 2023 - 12 - 22.
[8] HONG J, HAN ZW, NING XQ, et al. Aplicació de NAD⁺ com a marcador molecular per al desenvolupament personalitzat de productes per al diagnòstic de molèsties a l'òrgan genital femení [J]. Xina, 118109777A[P]. 2024 - 05 - 10.
